作者ameilover (思考该走的方向)
看板Biotech
标题[方法] 请问strategene的mutagenesis kit几个问题
时间Wed Mar 7 23:50:07 2007
最近要做mutagenesis了
但是看他里面附的protocol有些问题
1. 关於Dpn1: protocol说要把Dpn1从mineral oil底下吸起来(我看完的理解是这样)
要用"pointed pipet tip" 请问那个东西一定要用吗？ 可以跟谁买呢
2. NZ amine:我找了很多间公司，还没看到一个完全符合名字的产品
有很多名字很像的，但是又不晓得到底差在哪里，哪间公司的好用也不知道
请问有哪间公司可以直接买到NZY+ broth？ 拜托大家跟我推荐一家吧
3.tetracycline: protocol说那个competent cell是抗tetracycline的
所以就不能选择有同样抗药性的plasimd 是为了避免没有selection的效果吗？
我是实验室第一个做这个实验的人
附近的实验室也没有人在做@@
请有经验的版友们可以跟我分享一下操作上的经验吗？
谢谢
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◆ From: 125.229.40.84
1F：推 yadayada:要把Dpn1加到mineral oil底下的PCR reaction中(而非吸起) 03/08 12:36
2F：→ yadayada:也可以用其他的competent cell，并非一定要用该kit附的 03/08 12:39
3F：推 aceliang:我做完整个KIT十次反应连个屁都没有...差点被杀死...贵耶 03/08 19:05
4F：推 FlarePhoenix:可考虑改用Finnzyme Phusion site-directed kit 03/10 22:03
5F：→ FlarePhoenix:好处是可以先检验primer是否能够有PCR product在做 03/10 22:04