作者fungihsu (Work hard/Play hard)
看板Biotech
标题Re: [方法] 请问strategene的mutagenesis kit几个问题
时间Thu Mar 8 08:12:33 2007
※ 引述《ameilover (思考该走的方向)》之铭言:
: 最近要做mutagenesis了
: 但是看他里面附的protocol有些问题
: 1. 关於Dpn1: protocol说要把Dpn1从mineral oil底下吸起来(我看完的理解是这样)
: 要用"pointed pipet tip" 请问那个东西一定要用吗? 可以跟谁买呢
Mineral oil是早期的PCR机器没有加热盖的时候,为了避免液体蒸发才需要用的。
现在的PCR反应应该都不需要加了。
: 2. NZ amine:我找了很多间公司,还没看到一个完全符合名字的产品
: 有很多名字很像的,但是又不晓得到底差在哪里,哪间公司的好用也不知道
: 请问有哪间公司可以直接买到NZY+ broth? 拜托大家跟我推荐一家吧
通常这个我就用LB medium。
: 3.tetracycline: protocol说那个competent cell是抗tetracycline的
: 所以就不能选择有同样抗药性的plasimd 是为了避免没有selection的效果吗?
如果competent cell本身就有tetracyclin-resistance,用也是tetracyclin-resistance
plasmids做 transformation 的时候,无论cell本身有没有这个plasmid,都会有抗药性,
这样无法区分带有plasmid的clones。
: 我是实验室第一个做这个实验的人
: 附近的实验室也没有人在做@@
: 请有经验的版友们可以跟我分享一下操作上的经验吗?
: 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 130.126.51.136
1F:推 longy:没错~所以一般clone vector都是抗AP,胜任细胞则抗其他抗生素 03/08 16:45
2F:推 gjir:也可用SOC替代 03/10 21:49