lysis buffer的目的只是在把细胞弄破让里面的protein流出来 还有维持protein的稳定而已 所以要用什麽基本上是要看你想粹取的protein在那个位置 还有这个protein自己本身的特定 来决定lysis buffer的组成 刮刀reuse用酒精喷一下然後擦乾净就可以了 你也可以拿去用水洗 如果要用清洁剂 记得冲乾净就好 你学长用的第一种把两个lysis buffer混在一起 後面那个蓝色的应该是loading buffer 测protein concentration的时候 BCA跟Bradford 对於detegent还有一些离子的忍受度不一样 我猜是因为这个原因 所以才会先测完浓度之後 才把dye放进去 ※ 引述《[email protected] (六百)》之铭言： : ※ 引述《[email protected] (堕天使)》之铭言： : > 感谢你的回应。 : > 所以通常lysis是只分说要不要跑磷酸化吗？没磷酸化就通通RIPA这样吗？ : 就我所知 RIPA 用在磷酸化蛋白质上没有什麽特殊的问题 : 不过也有人说 侦测磷酸化如果碰上问题 可以换用别种 buffer 这方面我就不太了解了 : > 另外请问噜well时要怎麽知道细胞有破的很完全？会不会有细胞没破或是根本没括下来 : > 的情况？ : 有没有刮下来应该可以用肉眼看 : 或是用显微镜看 : 刮下来以後根本没在怕破不破啦 : 全部拿去煮一煮还有不破的道理？ XD : > 还有，因为我这边括刀只有三把，如果reuse的话，要怎麽知道有没有洗乾净？肥皂涂 : > 一下冲一下，再用tissue擦乾可以吗？ : 可以吧 我想不出来那有什麽特别的 甚至未必需要无菌啊 : 不过我都会拿漂白水泡一下 图个心安 --

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