作者dankai (寻访美妙好滋味)
看板Biotech
标题[讨论] IEF电压上不去!
时间Sun Oct 21 10:16:40 2007
最近在跑IEF时 电压就是没办法上到原本设定的8000V
通常我们解决的方法
不就是多清洗几次protein 让盐类降低
或者说IPG buffer浓度不要太高影响他的导电度
我想请问板上的大哥大姐们 <(_ _)>
大家会用什麽方法增加它的导电度或降低本身的盐类
还是溶解protein的sample buffer 里面的urea也会影响!?
谢谢!<(_ _)>祝大家实验顺利!
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小弟最近洗那些sample 洗到在度估!真该死> <
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.27.83
1F：推 toasting:用acetone先沉淀看看 10/21 11:25
2F：推 dankai:谢谢一楼!^^ 我目前就是用acetone沉淀的! 10/21 12:24
3F：推 belady:我之前跑电压也都上不去 不过安培数有到我的设定值 10/21 14:38
4F：→ belady:大约过了一个小时 电压才慢慢冲上去 10/21 14:38
5F：推 skyken10:用90%的acetone洗洗看~可能会让更多的盐类溶解出来~! 10/22 02:09
6F：推 dankai:^^谢谢大家~ 如果使用100% acetone效果会不会更佳!? 10/22 08:34
7F：推 piparing:可先把100% ACETONE冰在-20後 直接拿来WASH pellet 10/22 19:07
8F：→ piparing:另check ampholyte buffer的final浓度是否超过建议用量 10/22 19:07
9F：→ piparing:即IPG buffer... 10/22 19:08
10F：→ piparing:正常情形应是可直接到达8000 若需过一段时间才能上去 10/22 19:09
11F：→ piparing:可回头CHECK版友所提的所有问题... 10/22 19:09
12F：→ piparing:应是salt过高 致conductivity过大 使A变大 V上不去 10/22 19:10
13F：推 dankai:感谢P大~~^^~ 目前电压已经上去!我把IPG buffer浓度降低~ 10/22 23:43
14F：→ dankai:虽然是慢慢爬上去...我会在check一下!^^~ 祝大家实验顺利! 10/22 23:44
15F：推 silverberry:我以前是用 70% 冰冷 Acetone 洗 30 次以上 10/23 14:23
16F：→ silverberry:sample 是植物非水溶性蛋白~~ 效果勉强可以看~~ 10/23 14:24
17F：推 dankai:S大~我佩服你!!@@~30次....我洗十几次洗到在度估! 10/23 15:04
18F：→ dankai:我的sample也是植物的非水溶性蛋白! 加油~ 10/23 15:05
19F：推 piparing:洗30次...sample会不会lost掉太多阿? 10/25 01:12
20F：推 skyken10:哇塞~好厉害喔~洗30次~这样一整天就没了~!佩服佩服~! 10/25 23:20