※ 引述《[email protected] (脑残中...)》之铭言： > 如果是一般的immunostain > 我们做的方式大概是: > 例如使用贴附性的细胞 > 1. 准备3cm culture dish > (或是12well盘也差不多只要可以容cover slide即可) > 和盖玻片cover slide (小小正方形那种) 盖玻片比较正确的说法是 cover slip 或是 cover glass slide 原则上是"载"玻片限定 虽然有时候有人会混用 但是出现在 paper 上的 slide 基本上还是载玻片而已 ※ 引述《[email protected] (悠久の翼)》之铭言： > 看了两篇怎麽都跟我用的不一样Orz > 我是用之前那篇说过的Chamber slide (也只用过这种(￣ー￣；)) 就用跟不用 chamber slide 的差别而已 chamber slide 一片满贵的 而且不是没有它的缺点 所以有些人还是比较喜欢传统的盖玻片养法 > 1.前处理就跟sub culture一样打下来接下来就算好细胞量然後dilute到1000uL的 > 　medium中(chamber每个well 1.5ml就会满出来) > 　然後就种到每个well中　我用的chamber最多4 well > 2.等细胞贴附後就看实验条件在well里面进行处理 > 3.接下来抽掉medium再用PBS wash两次後进行fix > 4.fix溶液是用50% Acetone/ 50% methanol 每well 500uL 处理三分钟後抽掉 > 　用PBS wash 两次 > 　(Acetone+methanol好像是固定组织用的　那时候是参照一本Antibody的textbook > 上面immunofluorescence protocol章节提供的各种固定配方试出来最合我意的) 用有机溶剂 fix 应该是比较适合 cytoskeleton -- And my soul from out that shadow that lies floating on the floor 在那地板上浮动的影子中的我的灵魂 Shall be lifted- nevermore! 将永不再起... --The Raven by E.A.Poe -- ※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 192.5.109.49