作者iiidns (大野狼)
看板Biotech
标题Re: [求救] 想请教immunofluorescence的一些操作问题
时间Wed Oct 24 08:48:26 2007
※ 引述《[email protected] (六百)》之铭言:
: ※ 引述《[email protected] (脑残中...)》之铭言:
: > 如果是一般的immunostain
: > 我们做的方式大概是:
: > 例如使用贴附性的细胞
: > 1. 准备3cm culture dish
: > (或是12well盘也差不多只要可以容cover slide即可)
: > 和盖玻片cover slide (小小正方形那种)
: 盖玻片比较正确的说法是 cover slip 或是 cover glass
: slide 原则上是"载"玻片限定
: 虽然有时候有人会混用 但是出现在 paper 上的 slide 基本上还是载玻片而已
: ※ 引述《[email protected] (悠久の翼)》之铭言:
: > 看了两篇怎麽都跟我用的不一样Orz
: > 我是用之前那篇说过的Chamber slide (也只用过这种( ̄ー ̄;))
: 就用跟不用 chamber slide 的差别而已
: chamber slide 一片满贵的 而且不是没有它的缺点
: 所以有些人还是比较喜欢传统的盖玻片养法
使用哪一种方式都很不错用
以上的方式 在实验室经济况状不同时 我都使用过
一开始 就很开心的使用cheamber slide (NUNC)
(8/4/2 well 都有用过) 当下有大户的感觉 一下子 两百两百块的用
後来来到经济拮据的日子 老师说 那我们用cover slip用吧
(其实是老师的经费 被我这败家研究生花光)
再来 灭菌的步骤都来不及 就直接用 dish养 (很小的那种忘记是几公分的)
开始做染色时 就用Dako pen 画圈圈 (一各dish可以画两个圈圈或以上)
最後要封片就将dish的壁 用尖嘴钳夹掉
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综合过去的实验经过 chamber slide 是真的很方便 只是价格不斐
单纯只是要做几次 那是可以的 对於primary cell 数量不多的考量下
可以使用 而且使用 8 well 就可以染上至多八种抗体
如果是细胞株 可以用 cover slip 或 dish 养
但用dish养 就无法做细胞核染色 (加热会变形)
而且用Xylene在作封片过程 可能会有问题
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现在回头看 我以前好像在过 "抢球贫穷大作战"
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.163.64
1F:推 lockq:我们实验室买很多4和8WELL的 有需要急用的人 我可以分享出来 10/25 17:59