作者choyalove (我们说好了唷~)
看板Biotech
标题[求救] 药物颜色对 MTT 吸光值的影响
时间Fri Oct 26 14:14:10 2007
[原因]
实验的药物本身有颜色，在测定细胞存活率时候发现吸光值
异常高出control 组，怀疑是药物颜色残留而影响到的
[步骤]
我们实验室之前做 MTT 是
1. 种好细胞之後，培养24hr 让细胞贴附뀊2. 加药或是样品处理
3. 处理时间到达之後，吸除旧培养液
4. 加入 100 μl MTT 反应液 (0.5 mg/ml)，避光反应 1hr
5. 移除 MTT 反应液，加入 100 μl DMSO
6. 测波长 570nm 吸光
因为我样品本身就有颜色，加药时样品是以serium free DMEM 稀释
至作用浓度，虽然最後会移除掉含有样品的培养液，可是这几次数据
太诡异了，怀疑是不是我样品本身颜色残留而影响到後面 MTT 吸光...
我自己考虑方法是:
1. 作个对照组
但是我加 MTT反应液之前就会移除掉含有样品的培养液了
不知道样品颜色吸光对照要怎麽做比较好
2. 移除含有样品培养液之後，加 MTT 之前
加入一步 PBS wash 动作，可是我的细胞是 PC12，半贴附型不是贴很紧
我怕我多加洗的动作会造成细胞 loss 掉更多，误差更大 = =
不知道大家在进行 MTT 时，碰到样品或药物本身颜色深긊有什麽可以建议吗？谢谢~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.98.110
1F：推 nixo:用其他方法可行吗？例如冷光的方法。 10/26 16:47
2F：推 Highwind:都已经是候选compound了,又不是大筛,用数的取代MTT 10/27 01:44
3F：推 jojomoron:其他波长的光源??XD 10/27 09:04