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标 题Re: [求救] 实验的一些设计
发信站清华生命科学 BBS (Fri Nov 2 23:24:25 2007)
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※ 引述《[email protected] (雨人)》之铭言:
> 不好意思 又上来麻烦大家了
> 我想问一下在实验过程中
> 常会用到positive control、negative control、internal control
> 这些代表的是什麽意思啊
> 学长已经讲很多次了
> 但是每次学长跟我讲完还是一踏糊涂
> 没办法 天资不够><
> 经常实验设计少东少西的
> 可以请各位举个例子来解释吗
> 谢谢
比方说 我要作 PCR
所以设计了一组 primer pair
实验组当然就是用这组 primer pair 来作 PCR
positive control 就会是用一个已知的 作得出来的 Primer pair 来作 PCR
如果这样还没有东西 就表示你的实验组就算作不出来
也不一定是因为 primer pair 设计不好
而可能是其他药品器材出状况了
negative control 就是不加 primer pair, 如果这样还有作出东西
这就表示你的实验有污染或者是实验本来就会产生 background 值
internal control 通常是定量的实验才需要
假设你是要作以定量为目地的 qPCR
你必须确定你加在每一组反应中的 template (cDNA) 的量有多少
这时就可以用一个(理论上)在每组 template 中含量都相似的基因为目标
作 qPCR 来检测 template 的起始量
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