作者pent (情人去死)
看板Biotech
标题[求救] 如何做好 real-time PCR?
时间Tue Nov 13 00:54:35 2007
我的cDNA是一年多前翻的
浓度应该是16ng/ul
一直都冰在-20。C
用18S RNA当作internal control
每次都做duplicate,total 15 ul
今天作出来的结果
18S的duplicate CV都在0.5以下
但我的target gene 做4组
有3组CV超过0.5
版上的高手能不能给些做Q-PCR该注意的建议
或者说说做Q-PCR自己的一些小方法,来防止duplicate跑掉
现在觉得很沮丧,这个问题困扰我三个礼拜了
无法确定到底是我技术的问题
还是cDNA不稳定所导致 Q.Q
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◆ From: 163.25.118.144
1F:推 pluto2:如果cDNA是用dT primer做出来的,rRNA可能没有办法保存下来 11/13 07:49
2F:推 pent:cDNA primer是用randome hexamer做出来的 11/13 09:29