※ 引述《[email protected] (e04)》之铭言： > 如题 > 因为抽出来的DNA不纯 > 用OD值去测的结果非常不理想 > 跑胶後因为有smear的情形 > 所以也无法直接和marker比较 > 听说image j这个软体可以做这个分析 > 但是下载之後我却不会用 > 做到三条lane plot之後就卡住了 > 有没有人可以告诉我详细的分析方法 > （e.g 按a键--按b键...） > 谢谢 个人主观上认为 smear 太严重神也救不了你 另外用影像定量在准确性上本有一定的限制 个人的做法是 先要跑一张用各种已知浓度的 DNA 跑的 gel 照下来转灰阶（通常 8bit, 256 阶就够了） 放 imageJ 里面作 calibrate（calibrate 详细做法请查线上说明） 然後开你要测量的档案 先 subtract background （同样，详细做法查线上，不过我担心 smear 很严重的时候 background 会去不掉） 然後框起你要测的 gel 上面你认为可能是 signal 的部分 measure 他的 integrated density（记得在 set measurements 里面勾选先） 如果你 calibrate 有作对的话 会出现一个新视窗里面就有测出的量了 --- 需要的话可以回信跟我约时间 MSN 线上指导 费用是每一小时美金十五元，请捐给联合劝募 -- PTT 的推文站外看不到 本文来自生科站（telnet://140.114.98.20） 故 勿推此文 -- ※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 192.5.109.49