作者iamrim (\笨小孩)
看板Biotech
标题[求救] 关於stable transfection的问题....
时间Wed Nov 14 21:28:06 2007
利用transient transfection将expression vector(抗G418)送入後
(跑western 确定有送入)
已经用不同浓度gradient G418来筛选
不管用哪一种浓度的G418筛选
细胞总会出现状态不好(细胞皱缩.....等)
与正常健康细胞不太相同
我还要继续筛下去吗?!@@真犹豫...
各位大大会出现此种细胞状况不好的情形吗?.......囧
p.s第一次做stable clone.....就遇到瓶颈>"<
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.117.188.9
1F：推 vancent:stable clone不是那麽好做的~加油xd 11/14 21:29
2F：推 blence:出现"此种"细胞状况不好...是那一种? 没交代是没人救得了的 11/14 23:12
3F：推 iamrim:细胞株是用 CL1-5.....肺腺癌细胞 11/14 23:25
4F：推 sokolova:本实验室筛出的 stable clone和 parent cell也是长的不一 11/15 00:07
5F：→ sokolova:样，而且养久了就换新的细胞，因为他变了 11/15 00:08
6F：推 albertwang:这应该是杨院长家都要用的cell去那请问一下比较快 11/15 00:24
7F：推 wangba:有试试没有transfect的细胞单独加G418吗? 11/15 20:54
8F：推 iamrim:有......细胞在约4天到7天,每天都有细胞飘起来.... 11/15 22:20
9F：→ iamrim:直到没有细胞.... 11/15 22:24
10F：→ iamrim:不过学姐有叫我在挑stable clone约第7天改用20%FBS medium 11/15 22:24