作者ayinie (福小花是我家熊猫)
看板Biotech
标题Re: [求救] SDS-PAGE跑出来非常丑
时间Sun Nov 25 18:39:18 2007
图片来了
http://www.pixnet.net/album/paramyxo/13260373
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1F：推 Chelsea911:有图吗?这样讲很难判断~太多可能的因素了! 11/23 22:46
2F：→ Chelsea911:不过这样子看应该还是制胶的问题... 11/23 22:47
3F：推 sisyphus:觉得是buf的问题 11/23 23:38
4F：推 zoom8080:well先用running buffer冲乾净再loading试看看... 11/24 00:02
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请问这是什麽意思?
5F：推 Ren:running buffer是「新配」的吗？还是有用过？如果有用过，换. 11/24 00:23
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我们实验室的running buffer是一大瓶stock
平常要使用的时候再自行稀释
用完就倒掉不回收
所以...这样算新的吧?!
6F：推 greenmoon00:把"残骸"还送上来让大家评监评监...XD 有染色的更好 11/24 00:34
7F：推 JanChang:有气泡所以跑的时候撞上了？ 11/24 11:33
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请问这是什麽意思?
另外我看了一位板友的回文所附的网址
我觉得我的比较像这个
http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/studies/sds-page/gelgoofs/bizarre.html#2
sample 2
它上面的说明是电流太大以及过热
可是我以往用同样的条件去跑(120V/90min)就没有这情形
这次改用150V/20min;100V/90min的两段式跑法也是一样歪七扭八
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.209.190.2
※ 编辑: ayinie 来自: 210.209.190.2 (11/25 18:39)
8F：推 blence:如果你觉得是换buffer之後开始的,是否你有搞错浓度,看错配 11/25 18:46
9F：→ blence:方,或者像Tris base拿到Tris-HCl等,因为问题是这时候发生的 11/25 18:47
10F：→ blence:至於电压,160V/70min是我常用的条件,是也没有这种状况 11/25 18:49
11F：推 ayinie:Tris的问题可以排除 搞错浓度也没有 配方也没看错 11/25 19:05
12F：推 hkaiwei:你sample的buffer是什麽? 确定可以跑 SDS-PAGE吗? 11/25 19:40
13F：推 Chelsea911:Tris-base跟Tris-HCl只差别在pH值而已,其实都是Tris=-= 11/25 21:27
14F：→ Chelsea911:要注意的是配出来的BUFFER的pH是否正确,浓度是否正确 11/25 21:28
15F：推 nixo:跑之前用running buffer冲洗一下well内，可以用针筒或pipette 11/25 21:41
16F：→ nixo:因为gel凝固後会有些水份被挤出来，让well内有些杂质。 11/25 21:43
17F：推 liuse:不过你的marker很正常阿 11/25 22:59
18F：推 Chelsea911:PS:不是怀疑电压过高吗?怎你又用更高的电压=-= 11/25 23:28
19F：推 angelhunter:sample buffer 11/26 00:24
20F：推 pent:SDS浓度错误?因为前阵子实验室才发生过类似的情形 11/26 01:26
21F：→ pent:那次是因为SDS浓度只有正常的1/10,跑起来连marker都像海鸥 11/26 01:27