大家好 我目前正在做Pichia 表现系统 我是使用外泌性蛋白的菌株 不过很奇怪的事 我第一次做我要表现的基因这个实验时(小量培养) 用western 都可以侦测到我要的产物 可是第二次做的时候 也是小量培养 讯号就变弱了 等到第三次做的时候 就完全没有讯号 应该事没有表现蛋白 第四次做也是依样的结果 我每次做western都会把第一次实验有出现讯号的sample加入 当作positive control 每次都有讯号 我以为是我用的菌株所携带的质体发生什麽事情了 於是我再把这只菌涂在MD medium上测试 结果是OK的 会长 代表质体没有掉 可是不知道为什麽 只有第一次 第二次做的出来 对了 在做第二次的时候有换过新的甲醇 此外其他的操作过程都没有改变 我猜想可能是 induction出问题 可是我用其他的此基因的转型株 也是没有讯号 不知道各位高手有没有好的意见 谢谢 -- 三岁的时候你就偷看别人洗澡,四岁的时候你就逼人偷看你洗澡..... 七十岁的时候你这个老不休才想到要去割包皮, 七十一岁的时候你骗小女孩说要去看金鱼其实是想要非礼人家, 七十二岁的时候跑去做大玻璃看有谁光顾你就给他一块两毛五外加一个包子.. 你骂够了没? 还没!我想到刚刚骂你四十岁骂得还不够贱.真气人... --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.60.61 ※ 编辑: gloclovlo 来自: 140.112.60.61 (11/27 00:46)