作者xmanxpower (188)
看板Biotech
标题[求救] 关於利用P. pastoris表现的问题?
时间Fri Nov 30 21:01:27 2007
我是利用pPICZalphaC为载体以及SMD1168H为宿主
我要表现蛋白酶
问题一、
我看protocol上说明
当要表现重组蛋白时
菌要先活化到OD600=2~6
然後离心去除上清液後
pellet要用broth回溶至OD600=1
然後培养
我想问回溶到OD600=1是怎麽做的？？这一步骤
还需要注意啥事项吗？
问题二、
在培养後
每24小时都要添加甲醇诱导
请问一下甲醇添加的量可以过量吗？我有看过加到2％
protocol是写添加到final conc.为0.5%
问题三、
在培养Pichia时
请问1 Liter的三角摇瓶最多装多少broth?
摇瓶底部是有凹槽？还是平底的就好？
谢谢
可直接回信到我的ID
感恩
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.156.183
1F：推 huangsw:1.应该是指离心後 resuspension 到 OD600=1 12/01 14:21