作者Nikio (工作有够忙)
看板Biotech
标题Re: [问题]关於膜蛋白的萃取
时间Wed Dec 5 20:38:30 2007
我也在做膜蛋白的纯化实验
用的是古早方法....打破细胞後做超高速离心
最後离下来有点透明的就是membrane fraction了
不过有个小问题:
就是membrane fraction好像蛮难resuspense的耶
我用的lysis buffer是TBS+1% triton X-100,後来用到2%也有些溶不掉
请问版上有人做过类似实验吗?最後membrane fraction是用哪种东西溶掉的,感恩><
※ 引述《belady (白衣天使黑心肝)》之铭言:
: 目前我正在作这方面的实验
: 但材料是原核生物Gram negative bacteria
: 方法是先破菌(ultrasonication, fresh pression我都做过)
: 所得的crude protein在利用 ultracentrifuge进行萃取
: 所得产物及为膜蛋白(进行SDS page後可见许多蛋白质)
: 给你参考一下 不知道你合不合用
: ※ 引述《vancent (新的乡民XD)》之铭言:
: : homemade的话~
: : 你可以查查protein fractionation
: : 不过这只是个粗略的萃取方法
: : 你如果要很精细的话
: : 可以考虑梯度密度离心~像是用CsCl去做
: : 会比较纯
: : 我也刚做完这部份的实验xdddddddddddd
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