作者lazyQ (认真过每一天)
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标题Re: 菌液养太久(菌死光)plasmid会不会不见?
时间Wed Dec 5 22:39:18 2007
※ 引述《njp13 (.....)》之铭言:
: 之前因为KIT可能受到污染
: 所以抽出来的plasmid都不见了
: 在得知送sequence可以直接送菌液过去
: 我上周日就从冻起来的stock抽一点放到2ml LB broth养
^^^^^^^^^^^^^^^^^^
LB Broth养完之後咧?你该不会就整根eppendorf寄过去吧@@
这样不死才奇怪。
正常要 从stock沾菌,再用tip戳到LB Arga里面(LB arga内含抗生素)
再寄出去。这样即使厂商晚个2天才养菌也没关系。
: 周一让定序商收去作
: 隔了一天,今天(周三)定序商来电说抽不到plasmid
: 我第一个直觉是 他该不会把我的菌养超久才作吧?
: 所以就问他什麽时候帮我抽plasmid 什麽时候作定序的?
: 他说周二还是今天帮我抽的
: 也就是说我的菌在那2ml 的medium里面养了超过48小时(或更久)
: 养这麽久 菌早死光了
: 但想一想
: 这样的状况下plasmid会因为菌死光而抽不到吗?
: 不知道plasmid抽不到会不会是因为菌养太久的关系呢?
: 最近一直出问题
: 再不行就要整套砍掉重练了..
: 麻烦各位大大解惑阿
: 感谢!
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◆ From: 134.208.24.2
1F:推 njp13:没有耶..他是直接来收的..他有收菌液的sample型式 所以应该 12/05 23:05
2F:→ njp13:不用像您所叙述的那样处理 12/05 23:07
3F:→ njp13:所以您的意思是 菌死掉plasmid抽不到是正常的罗? 12/05 23:10
4F:推 satasumi:菌死掉抽不到是正常的啊,因为菌都死光了怎麽induce 12/05 23:50
5F:推 boblu:最好抽 plasmid 还要 induce 啦 12/06 05:43