作者buterscotch (##)
看板Biotech
标题Re: 菌液养太久(菌死光)plasmid会不会不见？
时间Thu Dec 6 01:03:54 2007
因为Amp在室温之下太久是会失去功能的
所以养菌养太久的时候
37C 的高温就会把Amp给弄坏掉
那就没办法提供有利的条件让有plasmid的那些菌生长
既然没什麽好处的话
那plasmid的制造就会变没啦
（plasmid上面有Amp resistance的基因）
大致上我想应该就是这样吧
说得不是很清楚
还有一个可能就是你的菌死了
如果要永久保存的话
请加Glycerol (大约一比一） 然後冰到 -80 C
要用的时候抽个 5 lambda 出来就可以养 成 10 ml 左右的 culture 了
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◆ From: 124.185.130.232
※ 编辑: buterscotch 来自: 124.185.130.232 (12/06 01:06)
1F：→ njp13:我了解您的意思，但是已经产生具有plasmid的菌是不是会在死 12/06 01:06
2F：→ njp13:亡後，plasmid也会被分解呢？ 所以之前产生的也抽不到 12/06 01:07
3F：推 HCCY:我印象中保存plasmid的菌株 有把一些DNAse基因KO 12/06 02:35
4F：→ HCCY:所以你说养太久抽不到 其实我觉得不太可能 12/06 02:36
5F：推 bioeric:就抗生素热挂了,菌不再需要plasimd保命,於是就被踢出菌外 12/06 20:13
6F：推 HCCY:但我还是不认为养48小时就会完全抽不到 12/07 00:22
7F：→ HCCY:你说的事情会发生 但是要到完全抽不到 至少要转养到不含amp 12/07 00:24
8F：→ HCCY:的LB 2-3代以上 才会大部分的菌都没有plasmid 12/07 00:24
9F：推 HCCY:^^第 12/07 00:27
10F：推 tankcase:请问 若将小量菌贮存在4度C,贮存多久算老化? 12/07 21:21
11F：推 buterscotch:存在 4C 一星期左右应该都没问题。然後在没 Amp 的 LB 12/07 22:50
12F：→ buterscotch:的菌会没有plasmid是我亲身的体验。 :P 12/07 22:50
13F：推 HCCY:我也曾经忘记加Amp养菌 但是还是有抽到plasmid 12/08 00:18
14F：推 njp13:结果我送新鲜的菌液给他们 就定出来了..可见真的是amp热挂 12/08 10:45
15F：→ njp13:造成杂菌丛生 使原本目标菌种被抑制掉，或者是plasmid被吐出 12/08 10:45
16F：→ njp13:菌体 接着被分解了 12/08 10:46