作者littlebu (LittleBU)
看板Biotech
标题[求救] 请问Anti-goat二抗的Blocking要用？
时间Tue Dec 11 18:39:34 2007
一抗是Goat anti-mouse的抗体
二抗是Rabbit anti-goat IgG
现在的问题是在western的时候会有background
membrane是用5%脱脂奶粉blocking 1hr
上网查到是说anti-goat IgG会跟bovine的IgG作用形成背景
所以脱脂奶粉或BSA皆不适合拿来Blocking
http://www.listarfish.it/lsf/jackson/Jack_BAG_IgG.html
那请问各位还有什麽适合拿来Blocking
另外我在做的是mouse tissue protein
有几支一抗是mouse monoclone antibody
但是二抗的goat anti mouse会有non-specific binding
换过一家的二抗也一样
请问有什麽方法可以将total protein内本来的mouse IgG去除掉？
谢谢大家，请多指教
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.175.107
1F：→ qqo8855436:我们lab.都用安佳脱脂奶粉 12/12 18:46
2F：→ qqo8855436:blocking完用pbst rinse一下换个一次水就好 试试.... 12/12 18:47
3F：→ littlebu:我也是用安佳,blocking完还TBST洗了也一样有背景 12/12 20:50
4F：→ littlebu:所以才很头痛,因为anti-mouse的二抗就不会有背景 12/12 20:51
5F：推 qqo8855436:1抗玩後 wash多换几次buffer 12/13 23:54