作者littlebu (LittleBU)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问Anti-goat二抗的Blocking要用？
时间Wed Dec 12 09:58:02 2007
※ 引述《[email protected] (六百)》之铭言：
: ※ 引述《[email protected] (LittleBU)》之铭言：
: Blocking with 5% normal serum from the host species of the secondary antibody
: 以你的状况来说 也就是 normal rabbit serum
我手边没有normal rabbit serum
所以我可能会试试借得到的normal donkey serum
希望没有更多问题产生 Orz
: 用 mouse ab 抗 mouse protein 就有怪到了吧？
: 解决方法，用 protein A/G beads 来给你的 lysate 作 pre clean 吧
因为大多数的monoclone都是mouse source
然後我们老师又特别爱用monoclone
所以...
谢谢您的回答
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.175.107
※ 编辑: littlebu 来自: 163.15.175.107 (12/12 09:58)
1F：推 zeratul1396:你是怎麽确定背景是因为二抗造成的阿?? 12/12 17:23
2F：→ littlebu:因为有做只处理二抗的control,还是有背景,所以跟一抗无关 12/12 20:54
3F：→ littlebu:而同样的blocking对anti-mouse的二抗就没有背景 12/12 20:55
4F：→ littlebu:所以才会想说应该是anti-goat二抗的问题 12/12 20:57
5F：→ julyselina:不好意思..问个问题~一般做monoclonal Ab都是要先将 12/13 01:36
6F：→ julyselina:antigen打入mouse体内产生immune response,所以如果是 12/13 01:37
7F：→ julyselina:anti-mouse的Ab不就等於老鼠会产生自体免疫??颇怪说 12/13 01:38
8F：推 boblu:小怪，不过也不是没有办法 12/13 13:28