作者NightAmades (夜)
看板Biotech
标题[求救] SDS PAGE gradient gel 制备
时间Mon Dec 17 10:47:17 2007
在下需求是希望将2D的第二维分的更开
好让我想观察的蛋白质spot可以更明显!
所以想请问有自制蛋白质梯度电泳胶经验的大大!
我使用制作DGGE的装置去做梯度胶!
可是有两种状况~
一：
用针头加针头，由中间缓慢load胶，
但是凝固後在外观上(隔玻璃看)
会有一圈一圈疑似"不连续面"的现象~
因为看到这情况就不敢直接用在sample上!
於是长是第二种做法如下：
二：
不加针筒直接load胶，由边缘缓慢注入。
结果发现第一种情况确实得到改善许多
(但是边边还是多少会有第一种情况一圈一圈的)
於是就用这样的胶片去跑第二维!
可是跑出来的结果显示出我整片胶的pattern会有"波浪状"(水平式)的现象!
同时跑两片胶，两片不同sample都如此呈现!
所以在此想请问大大是哪方面出问题或是需要改进!?
以及各位大大在自制gradient gel 有无其他更好的做法!
结果是漂亮的!感激不尽!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.243.40.249
1F：→ NightAmades:打错 是针筒加针头 = = 抱歉 12/17 10:47
2F：推 machin:有图吗?我猜可能是loading的sample浓度或体积不同所导致的, 12/19 10:31
3F：→ machin:所以我都会用PBS或是sample buffer补到一样的体积^^ 12/19 10:31