作者ppta (幸福的瞬间)
看板Biotech
标题[求救]电泳一定跑得出限制脢切的两个片段吗？？
时间Mon Dec 17 23:07:26 2007
如题，918bp应该切出615 245和58bp的，但我的电泳只看得到615，这样是不是做错了？
理论上有切出615应该还要有245的吧，而且亮度要一样是吗？
paper是写58bp看不到，但245咧？这样能判断吗？谢谢
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◆ From: 210.69.153.120
※ 编辑: ppta 来自: 210.69.153.120 (12/17 23:08)
1F：推 dankai:你的gel是几%的~ 12/17 23:09
2F：推 bluecsky:理论上..615的要比245的亮才正常吧?..还有你gel几%? 12/17 23:10
3F：→ ppta:2%的，还是因为我的BAND太微弱，615已经弱了，所以 12/17 23:22
4F：→ ppta:245看不到？ 12/17 23:23
5F：→ ppta:这个版好温馨 人数少少的 回答数度比某些几百人大版还快 12/17 23:23
6F：推 dankai:嗯!!你的band太弱了~再试试吧~你去切的可能再加一点!加油 12/17 23:28
7F：推 bluecsky:假如615就很weak..245自然很难看到.. 12/17 23:46
8F：推 sinwam:你有尝试去跑你pcr产物吗??也许该调整一下条件吧!! 12/18 00:00
9F：→ ppta:是喔？各位高手认为有看到615不能研判型别吗？ 12/18 00:04
10F：推 Crandy:你原来的DNA的量太少才会这样，请试着加大原来DNA的量试。 12/18 00:02
11F：→ ppta:另为另一种型别切成860跟58BP 12/18 00:04
12F：→ ppta:不能因为我跑出615就研判型别吗？谢谢 12/18 00:05
13F：推 sinwam:会有问题!也会被质疑!因为你说你的615太淡!所以建议再调整 12/18 00:04
14F：→ ppta:因为我现在是在职生，所以比较没时间做实验 12/18 00:06
15F：→ ppta:想知道这样能研判吗？感恩啊 12/18 00:06
16F：推 dankai:band太淡~被提出质疑的机率很大!该出来的band都出来才能正 12/18 00:14
17F：→ dankai:确判读~~~~当自己没办法确定时!怎麽说服别人呢~对吧! 12/18 00:16
18F：推 NKTcell:615很淡的话 245有可能会看不到 2%的胶正常可以看到245的 12/18 08:19
19F：→ NKTcell:除非你有跑跳海XD 12/18 08:20
20F：→ NKTcell:另外 2%的胶100bp左右的也看的到喔~ 12/18 08:21
21F：推 yucmbuu:染色的方法及时间也会影响到观察,小片段容易在染色时扩散똠 12/18 22:48
22F：→ yucmbuu:开而看不见,建议在做胶时直接将ethidium bromide加进去, 12/18 22:50
23F：→ yucmbuu:然後先空跑十分钟再加入样品,跑完直接观察,可能比较容易 12/18 22:52
24F：→ yucmbuu:观察到小分子量片段. 12/18 22:54
25F：推 jbking:用哪种enzyme阿 至少要提一下吧 12/21 11:09