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标 题Re: [讨论] 细胞transfection之後reseeding
发信站清华生命科学 BBS (Tue Dec 25 23:54:06 2007)
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※ 引述《[email protected] (不以物喜不以己悲)》之铭言:
> 我用293A cells
> 第一天 1 x 10六次方 seeding 在10cm dish
> 第二天 transfection (用CaCl2)
> 第三天 reseeding to 12 wells plate
> 遇到的问题是 第三天 加入trypsin後 细胞仍然贴的很紧不下来
> 大家都怎麻处理呢? 有人用刮的过吗?
> 谢谢大家
用刮的应该是取 lysate 用的...
可以改进的地方:
旧的培养液抽掉以後 用 PBS 洗两三次 确定洗净绝大部分的培养液
trypsin 回温到 37C
trypsinize 放到 incubator 里面一分钟或更久
再不行,加 EDTA 试试看(详细 propocol 自己上网查)
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莫非定律:
到了期末才会想起期初曾选了一门课却一直没去上
补充定律:
拿到成绩单才发现上了一学期的课忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: cpe-66-61-25-6.neo.res.rr.com
1F:→ bicon:many thanks 12/27 23:58