※ 引述《sinwam (sinwam)》之铭言： : 昨天帮你问了一下别人,他的答覆是不行!! : 他说:很少人抗体是anti-rat IgG2a or 2b,因为意义不大, : 而且不可能在同一片western上分别rat IgG2a and 2b, : 他建议你换rabbit & rat 的一抗,才有可能在同一片western上看到, : 不然就用同一个二抗 可是要在不同的western片子上看, : 一般2抗只有anti rat IgG(H+L) or IgG Fc or IgG F(ab')2 or IgG+IgM (H+L) or IgM : mu chain specific : 这是他昨天给我的答覆内容!!你参考看看吧!! 我想 真的是有二抗是 IgG2a or IgG2b (因为本人有用过 大家不要学.....) 以前的二抗分门别类的很细 (因为这是老板在她博士班留下来的...所以有大於10年以上) 现在可以选用 IgG 的来接合 2a or 2b 另外 介绍一家 我最爱的二抗 Jackson 啥都有 效果好 保存好可以放N年 http://www.jacksonimmuno.com/home.asp 其实 Western blot 也是变相的 IHC (都是抗原跟抗体....) 做双重染色(两种抗体)或是三种以上 都是可能的 只是要怎样去把非专一性结合去除 前一段时间 我把位置在 45 跟 55 的两种蛋白 同一张membrane上 同时染 两个不一样的抗体 (都是Rabbit anti-rat) 不过一开始 我是分别做 跟我後来赶时间 两个加加一起 出来的结果一样 这可能是我要庆幸的罗~~ (不过 我有先确定过 再加在一起反应看看) 反过来说 如果刚好这两个一抗一个是IgG2a and IgG2b 那我就可以用两种二抗罗 @.@ --------- 以上是我肚子饿乱说 试试看罗 : ※ 引述《piparing (批哩啪啦)》之铭言： : : 最近要使用两支Monoclonal antibody来做Western blotting : : 一支的Ig class是rat IgG2a : : 一支是Ig class是rat IgG2b : : 所以二抗理当要用goat(or other species) anti-rat IgG2a : : 以及goat(or other species) anti-rat IgG2b : : 但是这种针对IgG2a以及IgG2b的抗体很少且非常昂贵 : : 不知道我可不可只使用goat(or other species) anti-rat IgG这只抗体 : : 来分别侦测rat IgG2a以及rat IgG2b : : 这样可以成功吗? : : 或是有人能建议使用anti-rat IgG Fab or anti-rat IgG Fc ? : : 希望有经验且知道的版友能够分享经验 :) : : 也希望能提供可以做出来的antibody厂商 : : 非常感谢! --

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