作者iiidns (大野狼)
看板Biotech
标题Re: [问题] 冻细胞一问
时间Sat Dec 29 08:35:53 2007
※ 引述《mimosasky (浪者天涯)》之铭言:
: 我不知道不同细胞及其冻细胞的方法有否差异
: 我们实验室主要为3T3-L1
: 以DMSO为抗冻剂
: 放入液态氮前的过程简单多了
: 把细胞放入冷冻纸盒後
: 用多层的报纸包住就放入-80 overnight
: 第二天直接放进液态氮中
: 如此方法解冻下来的细胞存活率看也有6~70%
: 据说有人曾忘了把细胞从-80拿出来
: 结果细胞有活啦~但也不晓得是他本身冻细胞技术本身就有问题
: 细胞死亡率偏高....
那就又来说说 贫困实验室的我
以前实验室里面连液态氮筒是啥都没见过
要液态氮还得要去其他实验室 拿着自己的小钢杯 借点来用
所以 实验室里的细胞都是保存在 -80
通常我把细胞跟保存液(含有10%DMSO)
混合均匀後 很快的放在冰桶内(4度C) (我都会先准备好在操作台旁边)
放置10分钟 在放置在-20 约1~2小时 再转放在-80
就这样 因为没有液态氮筒啦
至少细胞拿出来解冻 细胞都存活的不错 (80%)
不过 如果有液态氮筒 当然是最好的啦
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