我提供我们实验室做的方式 ※ 引述《cutebetty (Qb)》之铭言： : 以下是我在网路上找到的方法 : 我有用过是可以的 有兴趣没钱买kit的可以试试看 : 4x10(6次方) target cells collect the cell sample in 1.5 ml eppendorf tube : --> spin down : --> resuspend with 0.5 ml PBS in 1.5 ml eppendorf tubes 55ul of lysis buffer : (40 ml of 0.5 M EDTA / 5 ml of 1 M Tris-Cl buffer pH 8.0 / : 5 ml of 100% Triton X-100 / 50 ml of H2O) 细胞收集後先wash 一次 lysis buffer 我们用的浓度比较低 5mL 1M Tris-HCl pH8.0 5mL 0.5M EDTA 4.38g NaCl 2.5mL Triton X-100 in 500mL 每个tube加1mL 加完lysis buffer之後 直接放冰上30-60min 冰上之後 加入等体积的 (phenol/chloroform/Isoamyl alcohol 25:24:1)溶液 votex ,会有明显乳白和水层两层 以 13000rpm离心2-3min 中间会出现白色一层 取上层液 加入另一eppendorff中 再加入大约等体积chloroform , votex 以 13000rpm离心2-3min 取上层液 再加入大约两倍体积100% EtOH ,1/10V NaoAc mix 後, -20度 沉淀至少半小时以上 取出离心13000rpm , 10min 去掉液体之後, 用70%EtOH wash一次 air dry 乾了之後 以含有RNase的ddH2O回溶大概 10-15ul的volume 放入37度水浴2hr 之後就可以用2% agarose gel 电泳 --

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