作者annesamuel (as)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问有关PCR的问题
时间Thu Jan 17 12:07:45 2008
※ 引述《annesamuel (as)》之铭言:
: ※ 引述《annesamuel (as)》之铭言:
: : 已重新做过很多次
: : 所有的东西都换新的
: : dNTP是附加在 Taq Mix里
: : Taq Mix 也是拿全新的
: : 跑电泳的胶也check过
: : 没loading sample时 是没有 band的
: : sorry, 我不知道如何把电泳的图档Po 上去
: 我的sample跑出还的长度大约 0.5Kb
: 如果annealing temp 提高 negative control 的band就不见了
: 但我的sample跑出来的量就非常少非常少
: 有的sample甚至跑不出来
: primer dimer的可能性也有考虑过
: 也有请我学妹做 结果也是一样
Negative control 的水是用0.2micrometer滤纸过滤再灭菌的二次水
引子 (primer)
Forward --- 968fgc序列 : 5’-CGC CCG GGG CGC GCC CCG GGC GGG
GCG GGG GCA CGG GGG G
AACGCGAAGAACCTTAC-3’
(with GC clamp)
Reverse ---1401r序列 : 5’-ATTACCGCGGCTGCTGG-3'
primer dimer 应该不会0.5Kb 这麽大吧
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.117.91.184
1F:推 sGoat:我做过2k的dimer,回家後帮你算,手边没软体... 01/17 12:38