※ 引述《canongirl (变 世上唯一不变)》之铭言： : 大家好，目前我手上有一个clone 要做 : 老师请我先去合两条primers 有53mer : 序列(举例)： primer1：5'ATCGCGTGATATGTGCTCATAGCT...3' : primer2：5'TAGCGCACTATACACGAGTATCGA...3' : 也就是两条完全pair，因为这53mer其中包含我要clone的insert 另外有两端各有BamHI : 的切位可以接在vector上 : 但因为这两条是ssDNA primer 老师叫把两条primer混合在一起 然後heating : 然後回到annealing 的温度，然後他们就会接在一起了@@ : 真的会接在一起吗？没有polymerase的帮助也可以黏在一起？ : 有人有过做这样cloning的经验吗 ？ : 天阿 救救我>< 你的意思是说你用合成的方式作成了两个primer(我觉得用sequence会比较好)... (sorry这是职业病,对於用字会很敏感...) 然後你要把这个complement sequence作成 5' ------------- 3' 3' ------------- 5' 这样的状态使它跟vector以BamH1切位接合... 然後只是要问经过加热後以annealing的温度作用完是不是能接合成上图是吧... 答案是ok的,不用加任何东西也会黏在一起... 请安心作... --

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