※ 引述《nidus (咕叽)》之铭言： : 我用的波片是dako poly-L-lysine coating micro slide : 切完片後 : 放在有乾冰的保温箱中 : 带回实验室 : 用PBS wash : 发现组织薄片全部都漂浮起来了ㄟ= =a : 请问有没有大大知道用什麽方法可以克服这个问题 : 谢谢 我想这种实验的问题只有自己才能抓到问题在哪。 因为有太多的参数板友们是无法知道的。 影响的因子太多，比方说： 1. 样本是什麽组织？ 是否该组织其表面就不容易黏附在 poly-lysine 上 (别人有没有人切过这种组织，实验室学长姐有没有人切过？ 结果又是如何？) 2. 包埋是用什麽 medium？ 是否该 medium 有特殊的性质，导致组织不容易黏附到 poly-lysine 上 (同理，其他人用一样的 medium 也有发生这事情吗？) 3. 切片的厚度是多少？ 是否组织的厚薄程度影响黏附的紧密程度 (也跟该组织的特性有关) 4. 切片完是否有先风乾？ 该 medium 是否回温完全溶化，而水分是否充分被风乾 5. 所谓的 "wash" 是怎麽 wash？ 用 pipette load 在旁边，还是整个 dip 进染色壶里头 还是有其它方式 我的作法： 组织先使用 paraformaldehyde 固定。 固定後使用 tissue freeze medium (Jung) 包埋。 切 10-20 micron，section 放在 poly-lysine 玻片上。 让玻片在室温风乾。(若需过几天再看，风乾後放 -20 度) 之後用垂直浸入 (dip) 染色壶的方式洗去 medium。 加 mounting reagent (若要保存的话，否则加 PBS)，盖上盖玻片。 结论： 我的作法是确定风乾後使用 dip 的方式洗去 medium， 组织不会脱离，不需要使用 acetone。 --

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