作者humwang (gogowang)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问利用matrigel混合细胞打老鼠长肿瘤
时间Mon Jan 21 21:37:26 2008
※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之铭言:
: 请问有人知道该怎麽操作吗?
: 因为最近要试
: 但是实验室没人做过
: 自己也是第一次做有点无从下手@@
: 但老鼠已经有点超龄了所以可能要快点打
: 可以请有操作过的人
: 告诉我如何操作的细节吗??
: 主要烦恼的是因为matrigel在室温似乎会凝固
: 在低温状态才是液状
: 但是我的细胞不能够在低温不然细胞会死亡
: 前一次打老鼠失败可能是因为这样子的缘故所以肿瘤长不出来
: 所以这次想要试试matrigel
: 感谢感谢
matrigel的确在室温温会凝固
我们实验室的做法是
先把matrigel从-20度放到4C回温, overnight(让它变成液态)
在hood把cell trypsin下来, 加medium及trypsin inhibitor中和掉trypsin
count count cell number, 然後取需要的数量的细胞suspension离心
然後用针筒(把针拔掉)mix 细胞跟matrigel(针筒要pre-cool)
然後立即皮下注射到老鼠体内
让细胞跟chilled matrigel contact的时间尽量少
细胞就不容易死, 或是打nude mice说不定会更好
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◆ From: 158.130.148.50
1F:推 asthma:附带请教一个问题, 一起打是要模拟cell embedded in ECM? 01/22 11:31