作者albertwang (会思考的鱼)
看板Biotech
标题Re: [求救] 做了好多遍的clone，就是接不上去，why?
时间Wed Jan 23 01:30:34 2008
※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯冲吗?)》之铭言：
: 我是用TA後的plasmid来切我的insert
: ※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯冲吗?)》之铭言：
: : 我最近正在接一段基因
: : vector:5.8kb
: : insert:700bp
: : 酵素切位:BamH1跟EcoRV
先问这两个都是vector上还是自己设计的就是在primer上
如果都是在vector何不试试其他的不要用平头的
: : 我切胶完之後，做胶纯化
: : (ps. 可以顺便问一下要如何做，纯度跟浓度才会高?)
: : 然後ligation时，insert:vector=3:1
: : 放在4度下过夜
: : 可是我一直做不出来，我也放过16度过夜
: : 温度啊那是试用室温看看
再来就是
你的buffer 出问题了
ATP额外加吧
除非你有习惯一买来就把BUFFEER分装
不然满容易ATP就坏了
还是接不上去
: : 想请高人指点迷津
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