作者kutoushinji (所有人都跟我犯冲吗?)
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标题Re: [求救] 做了好多遍的clone,就是接不上去,why?
时间Wed Jan 23 01:43:45 2008
※ 引述《albertwang (会思考的鱼)》之铭言:
: ※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯冲吗?)》之铭言:
: : 我是用TA後的plasmid来切我的insert
: 先问这两个都是vector上还是自己设计的就是在primer上
: 如果都是在vector何不试试其他的不要用平头的
酵素切位是我设计的
一个是平头的一个是sticky的
: 再来就是
: 你的buffer 出问题了
: ATP额外加吧
: 除非你有习惯一买来就把BUFFEER分装
: 不然满容易ATP就坏了
: 还是接不上去
好的,我今天试试看换新的buffer
我们家都是分装的,可能是我的buffer坏掉了
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◆ From: 140.130.98.66
1F:推 pizzicato:通常cloning出不来,假设没有其他奇怪的原因(例如抗生素 01/23 11:24
2F:→ pizzicato:用错XD) 一个是buffer坏掉,一个是vector或insert量不够 01/23 11:24
3F:→ pizzicato:有一些比较罕见的状况,问题出在 competent cell 01/23 11:25
4F:→ pizzicato:换一株high efficiency competent cell或用电的会好很多 01/23 11:25