※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯冲吗?)》之铭言： : ※ 引述《albertwang (会思考的鱼)》之铭言： : : 先问这两个都是vector上还是自己设计的就是在primer上 : : 如果都是在vector何不试试其他的不要用平头的 : 酵素切位是我设计的 : 一个是平头的一个是sticky的 : : 再来就是 : : 你的buffer 出问题了 : : ATP额外加吧 : : 除非你有习惯一买来就把BUFFEER分装 : : 不然满容易ATP就坏了 : : 还是接不上去 : 好的，我今天试试看换新的buffer : 我们家都是分装的，可能是我的buffer坏掉了 clone的切位能不用blunt end就不要用blunt end 假如你的buffer没问题的话 你可以试试让他ligation更久一点 我试过4度C放个三天..效果还不错 最快的方法还是重新设计一个primer改成两端都是sticky end.. 这样也不一定要在做一次TA..你可以把这次的plasmid当作template 然後做PCR直接拿product去用.. 总之有blunt end就是麻烦啦... --

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