之前有问过 TOPO 的问题， 现在又有了，想问问看有没有人知道。 就是阿... 我把 pcr 接到 Topo vecter 上之後， transform 到 E. coli 里。 但是呢... 隔天出来的 colonies 几乎都是 template vector... 明明就只有用一点点做 pcr, 接的时候也只拿 pcr product 的 2ul/50ul, template 的量应该是少得可怜， 可是 transformation 出来，存活的 colonies 都是 template。 (很不幸我的 template 跟 Topo vector 一样都是 Kan resistent) 我 labmate 的问题也是一样， 最後他的解决办法就是把要 pcr 片段从 template vector 切下来， 再用那个片段去 pcr 才解决这个问题， 可是这样很麻烦，难道每次用 Topo 都要这样吗？ 有没有人遇过同样的问题，或是知道为什麽会出现这种情形。 为什麽 bacteria 那麽喜欢 template vector, or 那麽讨厌 topo vector？ 感谢。 -- 　　梦想和现实是有距离的。 　　一切都将重新开始.... --

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