作者cyken (Ken)
看板Biotech
标题Re: [求救] deletion情况的primer设计
时间Tue Jan 29 14:28:59 2008
|<del>|
5'
atacatatatgtac...
tgtacaggtagcaatatacagtacacagaaacatctgc...
aatacccctgaacat 3'
3'
tatgtatatacatg...
acatgtccatcgttatatgtcatgtgtctttgtagacg...
ttatggggacttgta 5'
1st round PCR:
two individual PCR reactions, template DNA=the target gene
set#1:
primer:
atacatatatgtac
primer:
acatgtccatcgttatgtgtctttgtagacg
set#2:
primer:
tgtacaggtagcaatacacagaaacatctgc
primer:
ttatggggacttgta
Purify the PCR products of set#1 and set#2
2nd round PCR:
template=purified PCR products of set#1 and set#2
primer:
atacatatatgtac
primer:
ttatggggacttgta
Product of the 2nd round PCR should be
the target gene without the deleted fragment
※ 引述《worshiper (简单 就好了)》之铭言:
: 我是新手 所以没设计过相关的东西
: 现在有个gene想delete中间的一段 不知道该怎麽样来设计
: 听人家说设计的primer要有overlap到时候才能接成完整的片段
: 不过我听不是很懂 能不能有人帮我解释一下 举个例给我看啊 拜托了
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.32.9
※ 编辑: cyken 来自: 140.109.32.9 (01/29 14:30)
1F:→ worshiper:感谢你~跟我想的差不多 01/29 21:46
2F:推 chenmick:请问绿色和蓝色字相连的primer黏得上去吗?想说中间有少 02/01 13:31