作者skylawer (skylawer)
看板Biotech
标题Re: [求救] deletion情况的primer设计
时间Tue Jan 29 19:35:08 2008
※ 引述《cyken (Ken)》之铭言：
: |<del>|
: 5'atacatatatgtac...tgtacaggtagcaatatacagtacacagaaacatctgc...aatacccctgaacat 3'
<--------------
primer 1
: 3'tatgtatatacatg...acatgtccatcgttatatgtcatgtgtctttgtagacg...ttatggggacttgta 5'
----------------->
primer 2
step 1: PCR amplify (using ultra-pfu)
step 2: DpnI digest (remove template DNA)
step 3: clean up
step 4: self ligation
step 5: transform into competent cell
只须一天工与一对primer , 就可以得到你要的东西
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.66.215
1F：推 worshiper:blunt end要self ligation似乎会有太多结果啊... 01/29 21:44
2F：→ skylawer:不会有很多种结果 只有成功与失败这两种结果. 01/29 21:57
3F：推 blence:这不好,把primer1,2的5'分别增加primer2,1约10~15mer的长度 01/29 22:53
4F：→ blence:这样template就可以互补,而且只需要step 1,2,5就可成功 01/29 22:56