作者tincta (佑翔太MAN? 那改成薰吧.)
看板Biotech
标题[求救]有关IHC的问题
时间Wed Jan 30 23:47:50 2008
之前我在做IHC,是使用ZYMED的KIT,
其中blocking、一抗、二抗、...以及DAB呈色时,都为了避免浪费,
都是把上述试剂滴在sample上,然後用适当大小paraffin覆盖其上。
但是目前我新作的石蜡切片非常容易飘起来,
而且因为组织切片本身面积比较大,所以变很容易在这样的处理中使它凹折或是破碎。
所以我想问:
1.有没有盖paraffin以外的方法可以处理?
2.我有阅读KIT的说明书,其中有提到一抗时可放在潮湿盒
如果我想用潮湿盒的方法,那麽潮湿盒该怎麽做呢?
3.在这同时我Hematoxylin总是染的不够深,但我之前最长已经染过1min了,
所以也想请问如果是用KIT的大家都染多久呢?
PS.我的组织是养cell line然後注射进老鼠,之後再取下生成的tumor这样。
麻烦各位先进了。
BY 研一菜鸟 <(_ _)>.......
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因为在那一漫天纷飞的落叶中,
只有一片会在愿意理解并同情的持续注视下,在那个瞬间永远静止。
---------骆以军---------
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 211.74.180.250
1F:推 freesoul:wet chamber 拿个可以密封的保鲜盒里面舖层纸巾 用的时 01/31 07:29
2F:→ freesoul:候加水 总之让盒子里湿度越高越好Ab才不会乾掉 01/31 07:31
3F:推 roddic:请购买Pap pen 一种疏水性的笔 可在section周边画圈但很贵 01/31 11:44
4F:→ roddic:你用潮湿盒是没用的喔 要减少使用体积只能用画圈法 01/31 11:45
5F:→ roddic:一支pap pen 要价2000-2500左右 通常要一次买两支 01/31 11:46
6F:→ tincta:请问潮湿盒没用的意思是还是很容易乾掉吗? 那麽有没有其他 01/31 11:58
7F:→ tincta:可用的方法? 01/31 11:59
8F:推 lanth: 一抗的时候也可盖parafin 可以把Slides 肩并肩排好 01/31 12:58
9F:→ lanth:一次盖一大块这样省麻烦 再放入wet chamber中 01/31 12:59
10F:→ lanth:hematoxilin不够深就再加长时间 如果还是不行 就重新配吧 01/31 13:01
11F:推 lanth:Sample太大可能不好切 如果可以 就把smaple切成比较小块 01/31 13:04
12F:→ lanth:补充一下 一抗使用的体积视sample大小而定 01/31 13:06
13F:→ lanth:一片直径1cm的sample 15ul即可 01/31 13:09
14F:推 lanth:阿 原文没看清楚 sorry~~ 01/31 13:31
15F:→ tincta:谢谢大家~~ 01/31 14:26
16F:推 runpapa0520:HEMATOXYLINE 染完可以泡氨水 蓝化 01/31 15:54
17F:→ tincta:氨水的浓度和作用时间可以请教一下吗? 01/31 18:36