作者leafiness (叶深了...)
看板Biotech
标题Re: [方法] isolation murine primary macrophage
时间Mon Feb 4 13:06:43 2008
※ 引述《changyaowen (研究生活)》之铭言：
: ※ 引述《changyaowen (研究生活)》之铭言：
: 哇~~~~没人做过喔
: 有板友要分享一下的吗
: : 请问有板友做过这类的分离实验ㄇ
: : 一起来讨论一下
: : 我的目的 分离出mouse的peritoneal macrophage
: : 然後将primary cell immortalization 变成cell line
: : 我看了几遍红皮书(current protocol)的做法
: : 打入TG 等7~10天 用medium去冲洗腹腔中的细胞 离心 culture
: : isolation遇到的问题
: : 1. 在冲洗的过程 常常会去吸到组织或脂肪 非常不容易吸出medium
: : 2. 只要针一出体外 要再进去基本上很会漏medium
: : 3. 洗的过程 有时会不小心去吸到血液 应当是碰到血管了 有好的避免方法ㄇ
: : 4. 外观可看出腹腔中还有不少的medium 只是吸不出来
: : 其他就是 culture过程 有板友有照过图可以看ㄇ
: : 还是用怎样的方法去assay该cell是你要的macrophage
: : 一起讨论一下罢
: : ============================================================================
看十次红皮书...不如自己多亲手做几次喔 多做就会熟了
打TG之後有点等太久了，一般paper/protocol上差不多是 3% 1.6ml 三~四天
lavage过程 1ml针头打入约 5ml medium 後，使用 5ml 针筒抽取
抽取点基本上从腹膜中央入针，针头移动到腹腔右上方处抽取为佳
(左上方会有很多脂肪组织)
手稳一点应该是很顺就可以全部抽出来了
加油...等到有一天抽一只十分钟你就离毕业之期不远矣
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◆ From: 140.112.89.51
1F：→ leafiness:对了..其实我是来找primary macrophage怎麽翻译的... 02/04 13:08
2F：→ leafiness:都忘了 冏 有强者看过别人怎麽翻吗? 02/04 13:09
3F：推 changyaowen:个人觉得 primary macrophage<<<很怪 02/05 23:30
4F：推 Danielle:你这个叫 peritoneal macrophage吧 04/23 21:22
5F：→ Danielle:我是打10ml PBS进去 然後帮老鼠马杀鸡一阵 再抽出 04/23 21:22