作者phine (this is me)
看板Biotech
标题[求救]primer design之我是新手
时间Sun Feb 10 22:14:45 2008
大家好呦
最近想要找几种基因跑 Q-PCR
打算从NCBI找SEQUENCE
用PRIMER 3 来设计
请问一下在用PRIMER 3 设计的时候
大家会考虑到什麽参数呢
我目前只有对Tm 和PRODUCT SIZE有所限制
（我是用syber green系统）
另外
为配合其他基因一起跑
目前同一盘设定的温度为
annealing temp 60度
elogation temp 72度
请问这样大家会建议
PRIMER的Tm多少比较好跑呢
最後一个问题就是
我之前请明欣合成PRIMER
他合出来的Tm跟我当初设计的差很多
（低了二十度 70变50）
我反应後
他的理由是每种程式计算TM的方法有差
但是会差到那麽多吗？？
这样我的 annealing temp也不知道从哪里测试了 ︿︿；
有人有碰到跟我一样的问题吗
挖真是有点落落长
感谢大家的耐心欧
希望大家新年快乐呦
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