※ 引述《shonshonGie (＄７５)》之铭言： : (先说我操作的NF-kB的EMSA实验,使用的是panomics的kit) : 加入cold probe与hot probe竞争後, : 为何原有的band消失的话,就是specific binding呢? "可能"是specific binding 也就是说这段序列可能有你预测的TF consensus binding site 我会说可能是因为此shift被竞争掉也许是因为cold probe其他的序列所造成 而不是你预期的那个consensus binding site : 如果这是non-specific binding,加入cold probe不是也有band消失的可能吗? 可能 当你加到1000-10K倍时可能会发生 但50-200倍不太可能有这种情形 : 还是前提是:此probe与真正binding的位置有最好的specificity, : 所以先消失的band是真正signal : 但是之前学姐教我时说,cold probe要尽量加到使band都消失 我想他说的是cold probe和labeled probe是同一种序列 : 这不就是人工导致的结果? 不全然是 你误解了 : 还是加入cold probe做为control另有原因?? positive control or negative control : 我一直想不通,还被老板给问倒了>_<, 烦请板上各位指导指导罗 谢谢^_^ -- http://www.wretch.cc/blog/aggaci --

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