作者tinantai (小安)
看板Biotech
标题Re: [求救] 用什麽选择用GAPDH较好?或ACTIN较好?
时间Sat Feb 16 12:15:56 2008
※ 引述《qkenny (想变白的巧克力)》之铭言：
: 如题
: 在做PCR时
: 是否是 例如做代谢相关用ACTIN较好?
: 做structure相关用GAPDH做control较好呢?
: 谢谢
分享给你我的想法..希望有帮助^^
我在做realtime PCR时也有想过internal control的事情
其实是要看你的treatment会不会影响你所使用的internal control
也就是你所使用的internal control会不会因为你的treatment而改变
有几种方式来选择好的internal control
有一种是先定量RNA量, 所以在这种情况下..你的internal control应该要不会变
如果有变化..他就不能用..但是这种方式前提是RNA定量要很准..
我是用删去法..我通常会用两个不同pathway的internal control..
(Ex:actin是cytoskeleton,GAPDH是醣类代谢途径中的一个enzyme)
如果data出来的pattern是相同的我才相信我的data..
所以并没有说做代谢的都用什麽internal control或是做structure的都用GAPDH
我也有看到很多做糖尿病的用GAPDH当internal control
其他还有好多internal control可以选择
像是HPRT. beta-2m, cyclophilin....
有个网址里面有许多internal control的primer sequence..可以参考看看^^
http://medgen.ugent.be/~jvdesomp/genorm/
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