作者latte366 ( )
看板Biotech
标题Re: [求救] real-time pcr的问题
时间Sat Feb 16 16:58:52 2008
※ 引述《AS1 (AS1)》之铭言:
: 现在的问题是这台机器跟我没关系
: 因为要是我的话 我绝对不会买
: 但问题是现在买了
个人浅见:
再下觉得最大的问题不是机器
而是阁下的心态
如果所有生技人非用过的机器不做
或者有实验做不出来就怪当初为何要购买
那台湾的生技业就真的只是如此而已
就您所说 对方specilist来上第二次课的时候您已接手这份工作
那不是就该虚心求教 为何会躲得远远的 连听都不想听呢
况且操作手册您也是有 居然会连翻都不想翻!?
就您前文的叙诉 您真的了解melting curve 的意义是什麽吗
如果原理都没搞懂 就想上机 出了问题才来怪公司为何要买你不会用的机器
那我会严重怀疑阁下公司的人事遣派制度有无问题
当初面事时有无双方沟通好工作内容
方便透露一下公司吗 地雷别让後面的人也踩到
: 130万的机器 跑不出要的产物
: RT-PCR产物可能再两百多 结果去跑REAL-TIME PCR 结果都变成三百以上 甚至更高
: 不然就是没有BAND
: 关於罗氏的售後服务
: 我们几乎每周打电话过去(每周三通以上) 就是要她们来上机试做看看
: 结果都要三催四请
: 现在直接跳过技术专员 直接打给经理
: 因为技术专员时间很难等
我做过ABI 也做过Roche的仪器
个人觉得 ABI的售後服务的确是很棒!
但是Roche的也没像阁下说的那麽差
请问距离上次阁下请他们来上机 到现在隔多久呢?
Roche不是只有贵公司一家客户
讲一句较不中听的话
研究设备 动辄3、4百万以上的仪器比比皆是
不是买了个130万的仪器就可以等人来做好自己份内该会的事了
套句星爷的话 "实验,不是这样做的"
个人建议您先将实验原理 仪器操作步骤弄懂
以及格下检体的前处理步骤弄清楚有无问题
包括RNA的萃取、RNA 260/280 ratio、RT的步骤、tranditional PCR、电泳
reagent有无污染...etc
实验是一环扣一环的
在下虽然没有这里前辈丰富的实验经验及理论背景
不过还是私以为实验往往最大的问题不是来自机器
而是操作这些实验的人的步骤
而且trouble shooting
本来就是该从自己能解决且最有可能的地方先做起
难不成阁下真的有把握换了台仪器结果就一定很漂亮的出来??
: 前面说到要很纯的样本 罗氏会不知道我们需要的目的吗
: 卖机器的不会问对方需要什麽吗 就直接卖吗
很纯的样本不是问题
难到随便拿个ㄚ哩布达的东西跑得出来您会很高兴?
假设是抽RNA 纯度当然是越纯越好ㄚ
这跟对方需不需要知道您的目的是两码子事
您的实验要用到什麽样的仪器
本来就是自己该要先做功课 再去和厂商做洽询
: 这台机器买的人 不是我 以前学校有 但是在养蚊子
别一直强调买的人不是您
我猜您的实验室 有90%以上买的东西不是您
那您的学校还真有钱
可惜了那台仪器
如果是Roche的lightcycler那台真的不错用
操作得当 可为您省下不少宝贵时间
: 如果说要很纯的样本 罗氏干麻要我们买
: 他有英文的说明书 但我连看都不想看
: 之前上面的要我做 我都一直推掉 现在换学姊做
: (因为有碰过那台机器只有我跟她 机器在她进公司之後买
: 在我进公司之前买 要是我一定阻止下来 )
: 我不做是因为我不会做 她们来上课 我学校还没毕业 也都还没进入那家公司
: 一年做不到两百各检体 不知道为什麽要买那台机器
这里不缀诉 上面提过了
请您心态要调整一下
: 有本事卖 就要有本事建立环境给人家不是吗
: 这台机器采购 我还没进公司
: 真正做的都是底下的 有权购买的人 通常都是给意见 但不是第一线人员
还是那句话 请别强调机器买时您还没进公司
现在的日本人也会说南京大屠杀时他还没出生ㄚ.....(什麽跟什麽 这是废话!)
: 如果有人可以来台南帮我们做
: 我们愿意给车马费 而不是像罗氏的人 你应该怎麽怎麽做
: 对不起 都试了 做不出来
您不妨把您试过的条件 过程写清楚
说不定有些部分是您没注意到
我想板上很多有经验的前辈会不吝给您指教
至於想要请人代做 虽然那也不失一个方法
不过我只能说..
实验还是您自己的 尽可能得靠自己去完成他会有很大的成就感
现在有这个版面是让大家线上讨论
如果真有那麽好心的人 愿意帮忙人代做实验
我想我会很想发给他一张卡........(您真是个大好人ㄚ~~~~~~~)
: ※ 引述《qqo8855436 (一个人的生活)》之铭言:
: : ^^^^^^^^^^^^^^^-> 是什麽状况?? 没有您的产物??
: : 具我了解 roch有产品专员可以咨询讨论
: : 就要我们一试再试 REAGENT花六万多 还跑不出来
: : ^^^^^^^^^^^^^^-> 您可以拿跑完的去跑胶确认那些是什麽东西
: : ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^->不知到您是否真的了解何谓mealting curve??
: : ^^^^^^^^->这是他们的优点没错
: : system下品质就有他一定的要求
: : 才会有好的结果 但还是不一定做的出来
: : 但是建议您先了解何谓 real-time pcr
: : 以及他的分析原理
: : 谢谢
: : 感觉您对real-time pcr 这个系统不是很了解
: : 只因做不出您所预期的结果 就觉得仪器不佳
: : 要使用任何仪器及分析 不是应该充份了解在做吗??
: : real-time pcr 跟 一般pcr 会有一些该注意的地方
: : 不管是不是roch的机器 一些基本要具备的知识 还是要先去了解的
: : 祝您 实验顺利
--
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