作者findfavorin (小黄瓜)
看板Biotech
标题[求救]关於MTT assay用於计算组织培养的细胞量
时间Tue Feb 19 20:26:55 2008
请问板上的各位,有人是做组织培养,然後用MTT assay来计算Scaffold
上成长的细胞量吗?
我的实验流程如下:
1.将培养一天之後的scaffold,移除旧有的medium,以PBS wash,
再加入新的medium 及MTT reagent(2.5mg/ml),放入incubator 37度C
作用3hr
2.抽取MTT和medium上清液,以PBS wash,再用DMSO溶解formazan
3.取100ul溶解均匀的formazan至ELISA plate,并以DMSO当作blank
读取OD值
以上的实验步骤,如果是control组或是做standard curve,操作都会非常顺利
但在scaffold上 ,操作到第二个步骤时,DMSO却很难渗入Scaffold溶解formazan
可能是因Scaffold是3D网状结构,所以渗透需要一些时间,有试过放久一点,甚至都超过半
天了,还是无法均匀溶解,请问有人跟我一样吗?如果放在37度C作用可以吗?还是要
换个溶剂去溶解呢?
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