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标 题Re: [求救] Nickel beads可以拿来做Co-IP吗?
发信站清华生命科学 BBS (Thu Feb 21 02:50:38 2008)
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建议用 protein A/G beads coat anti-his-tag antibody
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莫非定律:
到了期末才会想起期初曾选了一门课却一直没去上
补充定律:
拿到成绩单才发现上了一学期的课忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: boblu.STUDENT.CWRU.Edu
1F：推 hosaile:我有想过 但是target protein的size和IgG太相近 02/21 12:24
2F：→ hosaile:作western压片的时候 target protein的band会被IgG的讯号 02/21 12:25
3F：→ hosaile:盖掉 所以才想用Ni-beads 02/21 12:26
4F：推 boblu:IP-western 不是这样做的好嘛... 02/21 23:03
5F：→ boblu:先用M抗his抗体作IP 然後用R抗his抗体作western 02/21 23:04
6F：→ boblu:最後用G抗R-Ig抗体作二抗啊 02/21 23:04
7F：推 blence:六百严肃了,其实h只要把标题改成用Ni-beads做pull-down即可 02/22 03:48
8F：→ blence:不过要小心容易trapping以及要挑选适合这个方式的control 02/22 03:50
9F：推 hosaile:我知道可以用不童species的抗体来做就不会有我说的现象 02/22 11:29
10F：→ hosaile:只是实验室刚好没有其他species的抗体 所以才想说用现成的 02/22 11:30
11F：→ hosaile:东西来做 boblu兄别生气啊~ 02/22 11:30
12F：推 boblu:我没有反对用Ni-bead啦. pull-down 原po文里有啦 02/23 00:16
13F：→ boblu:我只是说如果要用抗体抓 那 western 的时候就要用不同物种 02/23 00:17
14F：→ boblu:叫你们老板买嘛 抗his的抗体好便宜的 有时厂商还拿来当赠品 02/23 00:18