作者afraiddog (XP)
看板Biotech
标题[求救] 请问这些步骤理论正确吗?
时间Thu Feb 21 17:44:06 2008
1.将细胞溶於有蛋白ㄇㄟˊ抑制剂的缓冲液中，於室温与液氮罐中反复冻融2次。
(此步骤细胞裂解，细胞内物质释出)
2.匀浆4度C 600g离心10min。(上清液含细胞膜、线粒体细胞溶胶。沉淀中有未破碎的细
胞及细胞核。弃沉淀)
3.上清液4度C 8000g离心10min，弃沉淀。(沉淀线粒体)
4.上清液4度C 10000g离心20min，弃上清液。(沉淀为所要之细胞膜碎片)
还有请问打破细胞 利用反覆冻融法的话可行吗??
会不会让细胞膜破得太碎?? 因为想取得膜上蛋白所以不想太碎
还是超音波震荡比较好??
我们的sample是人类的癌细胞
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