※ 引述《dankai (冷泡茶)》之铭言： : 各位前辈好 : 小弟实验室目前在做植物蛋白质体的相关实验 : 基本的total protein 利用phenol都可以抽的出来 : 跑出来的2-D效果也不错! : 而目前要针对特定的植物组织抽取膜蛋白 : 参考许多篇paper大多都是提高extraction buffer的盐浓度 : 再来就是利用kit 或其他设备 : 而我们实验室都是利用传统萃取方法没在使用kit : 请问各位前辈是否有这方面的应用!! : 可以指教小弟一下或再叫我看某篇paper都可以 : 谢谢 ^^ : 祝大家实验都顺利 元宵节快乐 sucrose gradient 分离 基本上最少要有一台悬吊式的超高速离心机才能进行实验 首先就是要泡好各式不同浓度的sucrose溶液 如果有蠕动PUMP的话，依照浓度低到高分别的送入离心管的底部 当然这个过程最好全程在冰中进行，分层的效果会比较好 做出来的结果也会比较佳 至於超高速离心机要精准balance的部份就不说了 如果没有蠕动PUMP的话 也有个偷懒的方式 就是依照溶液浓度的高到低 (反过来罗，忘了结果就会很囧)， 分次加入离心管中 每加入一次，就送进-20度的冰箱冷冻 最後也可以有分层的效果 当时作genomic library时有用过 如果有需要再跟我联络吧 因为详细的步骤要翻箱倒柜才能重现天日了 --

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