作者littlehappy (小小的小快乐)
看板Biotech
标题Re: [问题] buffer pH值 会怪异的上升!! (已解决)
时间Thu Feb 28 18:01:59 2008
(((原文恕删...)))
藉着这个标题我有一个问题想请教各位板友~
如果Tris-Hcl会随着温度影响pH值
那以後注胶做SDS-PAGE的时候是不是都要维持调Tris-Hcl的那个温度才行?
不然这样Gel的pH值不对,跑出来的band是不是也会受到影响?
而running buffer也有含Tris-base，在冰箱冰存与室温回温是否pH值也会改变?
(虽然我们家running buffer是会测pH值，但是不调整pH值)
因为之前用GE的电泳槽(Amersham SE250)
跑完有的时候会在Gel上看到蓝色的dye变成黄色的现象
跟GE技术人员请教以及查看了板上的，都说是pH值的改变造成的
原先我们以为是电泳过热现象造成，所以置於冰上跑(我们cold room坏掉)
现在看到这篇文章突然想到，会不会是温度造成pH值改变而产生这样的结果
黄掉的地方似乎就不会在电泳往下跑了，附近的band也会被拖成歪歪的
要怎麽改善才好呢???
希望有经验或的板友可以给一点改善的建议...谢谢<(_ _)>
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◆ From: 163.15.175.170
1F：推 blence:虽然说"Tris-Hcl会随着温度影响pH值"不能说全错,但事实上是 02/28 18:52
2F：→ blence:pH值的量测值会随着温度而改变,"而且"在滴定调整pH值的酸硷 02/28 18:53
3F：→ blence:中和过程的放热反应是造成无法确认pH值的主因,你完全失焦了 02/28 18:55
4F：→ blence:另外,有些人调Tris会因为调过头又加硷,过多的酸硷中和产生 02/28 18:58
5F：→ blence:的盐,就很有可能使Gel产生温度过高,band丑丑的情况 02/28 18:59
6F：→ blence:要解决问题去别的lab就好了,这普遍的技术没你想得这麽复杂 02/28 19:01
7F：推 geltukou:呃..我这几天才碰到这个问题，重配过Running Buffer就正 02/29 22:44
8F：→ geltukou:常了。在发现之前跟老师讨论过，也可能是电泳系统的电压 02/29 22:45
9F：→ geltukou:太高或是电泳槽白金线的问题。 02/29 22:46
10F：→ geltukou:我的状况的话，应该是O/N的时候耍笨.....= =;;; 02/29 22:48