作者FIREWAVE ()
看板Biotech
标题[求救] 蛋白质湿式transfer至PVDF membrane的怪现象
时间Fri Mar 7 18:20:56 2008
已有爬过文,不过没有看到跟我一样的问题...
我们家是用 C.B.S SCIENTIFIC DCX-700的机器做transfer
机器图片连结：
http://www.cbsscientific.com/index.asp?PageAction=VIEWPROD&ProdID=57#
我一次是transfer一片gel,另一侧释放一块挡板（机器当初附的）
transfer的condition是 150 mA 90 min 4度C
PVDF membrane: 8cm X 6cm
transfer buffer: 0.025 M Tris
0.192 M Glycine
0.10% SDS
20% methanol
看到的奇怪现象是在transfer之後拿membrane去染Ponceau S,
发现membrane上面出现的是用来夹住gel跟membran的夹子上格子的纹路
整张membrane上都是空白格子中间挟着红色方块的图形
只有最旁边的marker是一条一条的band
请问有人遇过跟我一样的情形吗？
是机器的问题或是我操作上在哪里有可能出现忽略的部份吗？
麻烦大家指教了.......谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.115.48.151
1F：推 hek:你夹子没洗乾净 有残留的盐类 下次用之前多冲几次就没事了 03/07 20:42
2F：→ FIREWAVE:感谢回答 我再去试试看 03/08 10:11
3F：推 mournermind:Ponceau S不是染蛋白吗 为什麽和盐类有关呢?问一下... 03/08 15:03
4F：→ FIREWAVE:感谢一楼的回答 我把transfer的夹子洗乾净 transfer 03/10 16:54
5F：→ FIREWAVE:就ok了 谢谢 03/10 16:56
6F：→ FIREWAVE:回答三楼：整件事情是因为trnasfer完之後用Ponceau S染, 03/10 16:57
7F：→ FIREWAVE:发现transfer到membrane的protein pattern很怪,跟 03/10 16:58
8F：→ FIREWAVE:transfer用的夹子一样 一格一格的（没有band）所以推测 03/10 17:00
9F：→ FIREWAVE:在做transfer时,出了问题,然後问题出在夹子没洗乾净,有盐 03/10 17:01
10F：→ FIREWAVE:残留在夹子上造成的 03/10 17:03