作者kakaman (日子过的真快阿)
看板Biotech
标题[求救]lysis buffer
时间Mon Mar 10 14:26:10 2008
之前打破细胞都用RIPA buffer
因为要做2D
所以lysis buffer改用8M Urea
4% CHAPS
用起来感觉心惊胆跳...
因为很难将细胞打散 细胞会连像成一大条透明鼻涕...
之後放在冷房的摩天轮上一个小时
再离心11500rpm 20min
会发生pellet离不太下来的情形...
想问问大家的经验
另外想问的是wash buffer原本是使用PBS
但是因为它含有高盐 我以我改用Tris-sucrose buffer
没想到离心1500~4000rpm居然无法把细胞离下来
想请问大家做2D都用什麽当wash buffer
谢谢~~
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◆ From: 163.25.92.59
1F：推 aggaci:通常会黏黏的是因为Genomic DNA的关系，sonication即可解决 03/10 14:44
2F：推 kwanchi:黏黏会不会是因为 8m urea在4度c的关系? 03/11 16:37
3F：→ kwanchi:一般是收完CELL之後再沈淀 沈淀完再回溶在REHYDRATION BUF 03/11 16:38