作者artichoke (summerblue)
看板Biotech
标题Re: [方法] 问有关FLOW细胞处理的问题
时间Wed Mar 12 22:34:27 2008
这些抗体(B cell/ T cell marker及MHC II)是再来要染FITC作为二抗吗?
如果是的话，我们实验室常常是先固定起来，
一个星期之内上机分析，萤光都不会degrade得太严重。
(但我们实验室是做别种动物的phenotype分析，不是老鼠)
固定的方法非常简单：
染完二抗之後，cold PBA清洗三次，
直接加冰冷的1% paraformaldehyde in PBS固定之後放入冰箱避光保存即可。
但强烈建议，1% paraformaldehyde是要新鲜稀释的。
我个人的习惯是以10%的当作stock，要用的时候再用PBS稀释即可。
※ 引述《cathy17e (...)》之铭言：
: 各位板上的前辈们
: 帮帮我吧~~!!!!
: 事情是这样的,我们现在要将老鼠脾脏细胞取出来
: 然後染Ab去看他脾脏表面的B-cell,T-cell及MHC2
: 问题来了...
: 因为牺牲的当天无法马上上机去测Data
: 我想请问一下
: 假如要用Paraformaldehyde(PFA)去fix细胞的话
: 应该要怎麽做呢?
: 还是有其他更好的方法
: 可以在隔天上机测时不会影响data的表现
: 麻烦各位前辈解答....
: 谢谢了!!
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