作者Popopon (螺旋)
看板Biotech
标题[求救] 关於protein定量...如果不经过lysis细胞
时间Mon Mar 24 08:25:02 2008
我们在收完细胞後,并不会加lysis buffer
而是直接将细胞加入sample buffer後,煮10min
就直接loading做western的分析,
因此我们会尽量将cell数目控制在相近的量才收下来
再利用internal control来比较protein的相对量。
但是最近想要试试看比较准确的定量方式,
可是因为要看的protein是核内的,
所以一般lysis buffer有时会无法完全取出protein,
我们比较过一些比较强的lysis buffer
和直接煮掉的western
发现我们要看的protein在lysis buffer中的含量明显少於直接煮掉的sample
因此想要请问看看
是不是有可以不经过lysis细胞就能定另protein的方式呢? 谢谢
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﹏ *﹏ ∣ * ﹏﹏ * ﹏ 朵朵的浪花 随着风的旋律悸动着 . .. . ..
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﹏ 远方的黑暗 彷佛是一场梦的开始 .ˍˍ.
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╦═╦ 孤独的夜里 细细想着自己的琐事 █ \●
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║ ║﹋ 那是一种微薰而未醉的感觉...... █﹥
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1F:推 liuse:我们家有用6M urea lyse细胞後sonicate 03/24 14:21
2F:→ liuse:之後还是可以测Biored 03/24 14:22
3F:推 hjhao:你可能要用到BIO-RAD的RC-DC, 但之前应该不能放DYE 03/28 21:28